尊龙凯时提供的人前列腺癌细胞VCAP的培养说明书如下：

一、细胞培养条件

VCAP细胞的培养需要在特定条件下进行，以确保其生长和增殖的最佳状态。培养环境需保持37℃及5% CO2浓度。

二、细胞收到后的处理

收到细胞后，首先使用75%酒精对细胞瓶进行喷洒消毒，然后放置于超净工作台内进行严格的无菌操作。细胞应静置在37℃、5% CO2的培养箱中3-4小时，以帮助其恢复稳定状态。观察细胞生长情况，并针对不同倍数拍照保存（建议在40x、100x及200x下各拍摄一张），前三天的照片将作为重要售后依据。如未提供照片，则默认为细胞状态良好。

三、细胞培养步骤

a. 细胞传代

若细胞汇合度未超过80%，应将培养瓶中的完全培养液收集至离心管中，保留5ml完全培养基，继续放入37℃、5% CO2培养；若细胞密度超过80%，则可进行传代。具体步骤如下：

1. 弃去培养基，用不含钙、镁离子的PBS轻洗细胞1-2次。
2. 添加约1-2ml的0.25%胰蛋白酶消化液至培养瓶中，在37℃培养箱中孵育1-2分钟。观察细胞是否变圆并脱落，若是，迅速加5ml以上完全培养基终止消化。
3. 轻轻吹打细胞，使其完全脱落后吸出，并将悬液转移至15ml离心管中，在1000RPM下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2ml完全培养基重悬。
4. 按照1:2的比例进行分瓶传代，两瓶T25瓶各加5-8ml新鲜的完全培养基，并置于37℃、5% CO2的培养箱中培养。

b. 细胞冻存

1. 当细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时，弃去培养液，并用PBS清洗细胞一次。
2. 添加约1ml的0.25%胰蛋白酶消化液，待细胞变圆后立即加入5ml完全培养基以终止消化。轻轻吹打使细胞脱落，并转移到15ml离心管中，进行离心。
3. 弃去上清，沉淀的细胞加入1ml的雅吉生物无血清冻存液（货号：C7001），混匀后转入冻存管中。
4. 将冻存管直接放入-80℃冰箱中，若后续需转入液氮罐，应在-80℃冰箱中保存24小时以上再进行转移。

c. 细胞复苏

1. 从液氮中取出冻存管（需佩戴防护面具），迅速放入37℃水浴中解冻，直至管中无结晶，然后用75%酒精擦拭外壁。
2. 将冻存管中的细胞移入含5ml完全培养基的15ml离心管，进行离心处理。
3. 弃去上清，沉淀细胞重悬于5ml完全培养基中，接种至T25培养瓶，放入37℃、5% CO2培养箱继续培养。
4. 第二天更换为新鲜的完全培养基，以继续细胞培养。

四、注意事项

部分细胞在运输过程中可能出现脱落现象，这属正常情况。若脱落情况较为严重，可收集培养瓶中的所有培养液至离心管，进行离心处理以过渡培养。如细胞状态不佳，则需根据上述步骤进行处理和重悬。

五、售后条款

1) 可重发的情况

1. 运输过程中细胞存在丢失、瓶身破损、培养液漏液等问题，均可申请重发。
2. 若收到的细胞在48小时内出现污染，用户需提供真实实验结果，经核实后可申请重发。
3. 常温发货的细胞静置24小时后，干冰冻存的细胞如复苏后24小时内大部分细胞失活（需提供清晰状态照片），可重发。

2) 不重发的情况

1. 因客户操作不当或污染导致的细胞问题不予重发。
2. 使用非推荐培养体系或未提供细胞培养前3天照片的情况，同样不予重发。

尊龙凯时希望您在细胞培养过程中能顺利进行，并欢迎随时与我们联系以获取进一步的支持。