TurboTEV蛋白酶是一种具有增强形式的烟草蚀刻病毒（TEV）N1a蛋白催化片段的半胱氨酸蛋白酶，能够识别Glu-Asn-Leu-Tyr-Phe-Gln-Gly切割位点，并在Gln和Gly之间进行切割。该蛋白酶在4°C下展现出强大的活性、优异的特异性和卓越的稳定性，使用时无需任何特殊的缓冲液，可以与最适合目标蛋白的缓冲液配合使用。“尊龙凯时”致力于提供高性能的生物技术产品，以满足科研人员的需求。

TurboTEV蛋白酶的分子量为52kDa，并带有GST和His标签，因此能够轻松通过Ni螯合或谷胱甘肽（GSH）树脂去除剪切标签。其来源于大肠杆菌，活性超过10单位/µg，1单位TurboTEV蛋白酶在30°C下能在1小时内裂解3µg对照底物的85%。这使其在蛋白质研究和开发中成为一种理想的工具。

Protocol：

1. 在溶液中裂解：

• A. 配制新鲜的冰冷透析缓冲液。一个例子为：25mM Tris-HCl, pH 8.0, 150-500mM NaCl, 14mM β-巯基乙醇。
• B. 稀释目标蛋白样品池。在透析缓冲液中将目标蛋白浓度稀释至1-2 mg/mL。注意：若目标蛋白在透析缓冲液中聚集，则可选择不进行此步骤。保留一小部分未切割样品用于分析。如果目标蛋白样品是从镍柱洗脱，并且EDTA与目标蛋白兼容，可以加入EDTA至最终浓度0.5 mM。
• C. 按照蛋白酶与目标蛋白1:100（w/w）的比例加入TurboTEV蛋白酶，100 mg目标蛋白对应10,000单位（1 mg）TurboTEV蛋白酶。
• D. 在4℃下用透析缓冲液透析过夜（约16小时）。

2. 去除TurboTEV蛋白酶：

• A. 上柱
• B. SDS-PAGE分析（可选）

产品应用：

• 蛋白裂解功能；
• 从重组蛋白中去除融合标签；
• 蛋白质和肽的纯化。

常见FAQ：

1. 问：对于TEV消化反应，使用的缓冲液条件有多重要？是否有条件可能对TurboTEV的剪切效率产生不利影响？

答：1 mM的DTT可以使用；不推荐使用10%的甘油和20 mM组氨酸；不建议使用500 mM NaCl和100 mM Tris；β-巯基乙醇的功能与DTT类似，可以加入。

2. 问：剪切之前是否需要缓冲液交换蛋白质？

答：这可能是必要的。

“尊龙凯时”自2003年成立以来，一直为生物研究领域贡献力量，并为学术界及产业界提供高品质的技术支持和产品服务。我们的产品涵盖免疫学、细胞生物学和分子生物学等领域，包括代谢检测试剂盒、ELISA试剂盒、生化试剂、抗生素、核酸酶、蛋白酶/蛋白激酶、引物等，旨在为科学研究提供可靠的保障。