什么是包被细胞培养瓶试剂?包被细胞培养瓶试剂是一种用于处理细胞培养容器表面的化学物质,其目的是模拟细胞在体内的生长环境,从而促进细胞的附着、扩展和增殖。通过包被处理,培养表面能够更有效地支持细胞的生长及功能表达。本文将详细介绍几种常见的包被试剂及其特性,并分享包被操作的注意事项,助您轻松提升细胞培养效果。
常见的包被细胞培养试剂及使用方法
1. 明胶(Gelatin)
尊龙凯时推荐使用明胶作为包被细胞培养板或培养皿的试剂,以促进细胞的粘附和增殖。明胶具有优良的生物相容性和细胞粘附性。
适用细胞:胚胎干细胞、间充质干细胞、内皮细胞等。
特点:价格低廉,易于操作,能够提供可靠的细胞附着支持。
使用浓度:1-20mg/ml。
包被体积:通常以完全覆盖培养瓶底部为准,T-25瓶需25ml,T-75瓶需75ml。
包被条件:37°C孵育≥2小时或4°C过夜。接种细胞前需吸除多余明胶溶液,并用PBS洗涤1-2次。
2. 多聚赖氨酸(PLL)
多聚赖氨酸(PLL)是一种包含分子量在70,000至300,000之间的聚合物,常作为细胞培养中的粘附剂。
适用细胞:神经元细胞、原代细胞、悬浮细胞等。
特点:通过静电作用增强细胞附着,适用于难以贴壁的细胞。
常用浓度:0.01%至0.1%(w/v),即0.1mg/ml至1mg/ml。
包被条件:37°C孵育≥2小时或4°C过夜。使用前需吸除多余溶液,并用无菌PBS冲洗1-2次。
3. 重组人纤连蛋白(FN)
重组人纤连蛋白(FN)是一种重要的细胞外基质蛋白,具有多种生物学功能。
适用细胞:干细胞、间充质干细胞、内皮细胞、上皮细胞、肿瘤细胞、成纤维细胞。
特点:能够提高细胞的贴壁率,增强细胞代谢水平,缩短细胞生长时间。
常用浓度:1µg/cm²至10µg/cm²。
包被条件:37°C孵育≥2小时或4°C过夜。
4. 鼠尾胶原蛋白Ⅰ型包被液(1mg/mL)
鼠尾胶原蛋白是胶原蛋白的一种,适用于多种细胞类型的培养,能够模拟细胞外基质的环境。
适用细胞:上皮细胞、肝细胞、肌细胞等。
特点:可以制备成清晰的凝胶,提供3D基质或表面涂层,促进细胞的贴壁和增殖。
常用浓度:1-5µg/cm²。
包被体积:T-25瓶需25ml去离子水与50µl(1MG/ML)鼠尾胶原蛋白Ⅰ,放置4°C过夜,吸出胶原蛋白溶液后PBS洗2-3次方可接种细胞。
包被注意事项
1. 尊龙凯时提醒您进行无菌操作,所有操作必须在无菌条件下进行,以避免污染。
2. 确保包被试剂均匀覆盖在培养瓶底部,避免局部过厚或过薄。
3. 根据细胞类型与实验需求优化包被试剂浓度。
4. 根据实验要求调整孵育时间,以确保充分包被。
5. 包被后的培养瓶短期可存放于4°C,但建议尽快使用以获得最佳效果。
通过选择合适的包被试剂并遵循正确的包被步骤,您可以有效提升细胞的粘附与生长,为后续实验提供可靠的细胞模型。