在生物医学的广袤领域中，神经退行性疾病无疑是最为神秘且令人揪心的研究课题之一。这类疾病如同潜伏在大脑深处的“隐形杀手”，无声无息地侵蚀着患者的神经细胞，导致一系列令人无奈的症状，包含记忆衰退、运动功能障碍、认知能力下降及情绪失控等。每一种症状都像一把利刃，悄然切割着患者及其家庭的生活。

目前，神经退行性疾病（NDDs）包括阿尔茨海默病（AD）、帕金森病（PD）、肌萎缩侧索硬化症（ALS）以及亨廷顿病（HD）。这些疾病的共同特点是错误折叠的蛋白质在神经细胞中异常聚集，导致神经元功能丧失甚至死亡。其中，亨廷顿病因单基因显性遗传的特性尤为特殊，作为神经退行性疾病家族中的“典型代表”，以其独特的遗传性和毁灭性的病程让无数家庭陷入绝望的深渊。患者因基因突变产生突变亨廷顿蛋白（mHtt），其N端多聚谷氨酰胺（polyQ）片段形成不可溶的聚集体，患者因此逐渐出现不自主运动、认知障碍、精神行为问题，甚至体重持续下降，通常在确诊后仅能存活15-20年，目前尚无根治手段，现有药物仅能缓解部分症状。因此，早期诊断和精准量化mHtt蛋白成为延缓病情的关键突破口。

传统检测方法（如免疫组化、滤膜捕获）存在灵敏度低、操作繁琐、无法动态监测蛋白形态变化等局限，严重制约了疾病机制研究和药物开发。为了更好地了解蛋白质的聚集情况，亨廷顿蛋白（mHtt）在疾病进展中，其可溶性单体与聚集态纤维之间存在动态变化：早期的可溶性mHtt可能具有毒性，促进神经元损伤，而聚集态mHtt虽然形成包涵体，但其毒性作用仍存在争议。传统技术难以精准区分这两种形态，更无法在微量样本中同时定量分析，这导致关键病理机制长期成谜。

创新的TR-FRET双重免疫分析方法

TR-FRET技术基于荧光共振能量转移（Förster Resonance Energy Transfer, FRET），通过标记抗体对来检测抗原。该方法利用稀土离子荧光团供体与受体荧光团之间的能量转移，当供体和受体标记的抗体同时结合抗原时，会产生特定的TR-FRET信号。该技术的优势在于高灵敏度、特异性、快速、使用小体积样本及多重检测潜力。

在可溶性mHtt检测中，使用2B7和MW1抗体对靶向mHtt的N端表位。MW1特异性识别扩展的polyQ序列，当mHtt聚集时，该表位被掩盖，导致TR-FRET信号丢失。聚集态mHtt检测则使用4C9和MW8抗体对，这些抗体能够特异性识别mHtt聚集物，即使在聚集物中，抗体也能找到多个结合位点，产生TR-FRET信号。这一设计克服了传统方法中表位遮蔽的难题，宛如为蛋白动态装上了“实时监控探头”。

技术优势与应用前景

TR-FRET技术的优势体现在多个方面：在5微升样本中能够同步定量可溶性与聚集态mHtt；超高灵敏度可精准识别低至300kDa的可溶性片段与950kDa的聚集态复合物；同时能够动态追踪可溶性mHtt减少与聚集态增加之间的负相关关系。在亨廷顿小鼠模型研究中发现，小脑与海马的聚集速率低于纹状体，显示脑区特异性病理差异；在睾丸等高增殖组织中，尽管可溶性mHtt含量较高，却无聚集冰，无疑挑战了传统观点，即“聚集即毒性”。这些发现为开发靶向可溶性mHtt或抑制聚集的治疗策略提供了关键工具。

从实验室到临床的桥梁

TR-FRET技术离不开高性能酶标仪的核心支持。尊龙凯时的SpectraMax iD5仪器具备6种功能，包括荧光、发光、光吸收等基本检测功能，支持共振能量转移技术，如FRET、TR-FRET、BRET1等。仪器的独特优势在于多通道检测，可同步读取不同荧光信号以避免交叉干扰；同时支持超微量分析，能够降低实验成本。此外，其自动化兼容性使其与高通量平台无缝衔接，加速药物研发进程。

对于科研人员而言，TR-FRET不仅是解密退行性疾病的“钥匙”，更是推动精准医疗落地的利器。未来，TR-FRET有望成为阿尔茨海默症、帕金森病等蛋白聚集疾病研究的标准工具。

展望未来

亨廷顿的研究突破彰显了技术创新对生命科学的深远影响。TR-FRET技术凭借其灵敏、高效和多维分析的特性，为退行性疾病机制研究与治疗开发开辟了新路径。也许在不久的将来，我们不仅能够“看见”蛋白的异常聚集，更能通过精准干预，按下疾病进展的“暂停键”。