尊龙凯时细胞简介：THP-1细胞系是从一名1岁急性单核细胞性白血病男孩的外周血中分离建立的。该细胞系具有吞噬乳胶颗粒和激活红细胞的能力，细胞膜和胞浆中不含免疫球蛋白，同时表现出C3R和FcR的表达。THP-1细胞可被佛波酯TPA诱导向单核系方向分化，并可作为转染宿主。

细胞信息

细胞名称：THP-1人单核细胞白血病

• 生长特性：悬浮生长，低密度易聚团，高密度时细胞分散。
• 倍增时间：60-70小时（PubMed=6970727），26小时（PubMed=25984343），约35-50小时（DSMZ=ACC-16）。
• 换液频次：每周2~3次。
• 传代比例：1:2-1:4（具体比例视细胞量而定）。
• 传代细胞密度应在8×10⁶/ml，且不超过1×10⁶/ml。

培养基推荐配方

使用RPMI-1640培养基（中乔新舟货号：ZQ-200），加入10%胎牛血清（中乔新舟货号：ZQ0500），1%双抗（中乔新舟货号：CSP006），以及最终浓度为0.05 mM的β-巯基乙醇（中乔新舟货号：CSP005，添加量为500 ml时需加500 μl）。β-巯基乙醇是一种重要的培养补充剂，具抗氧化作用，有助于减少氧化应激对THP-1细胞的影响。需要注意的是，在细胞密度过高但需维持的情况下，可以适当增加巯基乙醇的比例，但不超过标准量的15倍。

细胞复苏

THP-1细胞复苏后通常需3-5天以恢复状态，细胞状态对密度有一定依赖性。如果在复苏时离心去除冻存液，建议在复苏后的48小时内不要进行其他操作。低密度时细胞聚团生长属于正常现象，通常为快速增殖的一个阶段。

细胞传代

A. THP-1细胞为悬浮细胞，具有低密度依赖性。当细胞密度达到8×10⁵个活细胞/ml时需要进行传代，且细胞密度不得超过1×10⁶活细胞/ml。

B. 传代时比例一般为1:2-4，可在分瓶后补充培养液，无需离心。假设使用T25培养瓶，可以在分瓶后向每瓶补充至7 ml的新鲜完全培养基。

C. 如果对悬浮细胞的密度控制不佳，最佳的方法是进行细胞计数。

D. 可以在培养约一周后进行一次离心，以去除部分死细胞。

细胞冻存

A. 冻存时可用10% DMSO：900 μl FBS + 100 μl DMSO（操作时需小心，以免中毒），或直接使用无血清冻存液。

B. 将生长状态良好的细胞收集至15 ml离心管中，并调整细胞浓度至200万-300万/ml为宜。

C. 根据情况放入-80℃培养箱中，最多存放3个月，尽快转移至液氮中以进行长期保存。

常见问题解答

1. THP-1细胞在培养过程中出现聚团怎么办？少量的细胞聚团呈现葡萄串状，属正常现象，尤其在细胞密度较低时更易出现。高密度时细胞会自然分散。如聚团问题严重，可通过观察细胞状态、调整巯基乙醇添加量、更换血清品牌或增大血清比例（不超过20%）来解决。

2. THP-1细胞在培养过程中出现贴壁怎么办？少量细胞贴壁属正常情况，可轻轻吹打收集细胞或丢弃贴壁部分。如果贴壁细胞比例高于20%，则需要检查培养环境，包括温度、CO2浓度、培养基成分及培养器皿是否异常。

3. 如果THP-1细胞复苏率低该怎么办？由于THP-1细胞的冻存后复苏率较低，在冻存时应适当提高细胞量，复苏时活细胞密度需在100万-300万/ml之间。复苏后需培养3-5天直至状态恢复。如出现细胞碎片，待细胞密度增大后可通过低速离心去除。此细胞为悬浮细胞，培养时应尽量减少对细胞的离心处理，并在换液时避免完全更换培养基。添加的β-巯基乙醇应现用现配，切勿直接添加至长时间储存的培养基中以维护其稳定性。